本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，具體涉及一種氯苯唑酸及其藥學(xué)上可接受的鹽在預(yù)防、減輕或治療與hif-2α相關(guān)疾病的用途。

背景技術(shù)：

1、在低氧環(huán)境中，機(jī)體能夠自發(fā)的發(fā)生低氧反應(yīng)以維持機(jī)體的氧獲得能力。1992年，semenza等發(fā)現(xiàn)一種蛋白能夠特異性結(jié)合于促紅細(xì)胞生成素基因的低氧反應(yīng)元件(hre)，并影響某些基因的表達(dá)，該蛋白被稱為低氧誘導(dǎo)因子(hif)(semenza?gl等人，mol.cellbiol.,1992,12,5447-5454)。hif的靶基因十分廣泛，能夠影響機(jī)體造血功能、血管生成、鐵離子轉(zhuǎn)運(yùn)、葡糖利用、抵抗氧化應(yīng)激、細(xì)胞分化、細(xì)胞生存和凋亡、細(xì)胞外基質(zhì)穩(wěn)態(tài)以及腫瘤發(fā)生。hif是α、β亞基組成的異質(zhì)二聚體，α亞基屬于功能性亞基，對(duì)細(xì)胞內(nèi)氧濃度的變化非常敏感并受高度調(diào)控，有調(diào)節(jié)hif活性的作用；β亞基是結(jié)構(gòu)亞基，又稱作芳基烴受體核轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(arnt)，在細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定表達(dá)，其mrna轉(zhuǎn)錄和蛋白的表達(dá)水平不受氧濃度變化的影響。hif的α、β亞基都屬于堿性螺旋-環(huán)-螺旋轉(zhuǎn)錄因子超家族成員。人類的hifα有hif-1α、hif-2α、hif-3α三種亞型。hif-1α在體內(nèi)呈普遍性分布，并在局部組織缺血或缺氧引發(fā)的血管生成過(guò)程中有重要作用，但是對(duì)鐵代謝過(guò)程的影響較??；hif-2α呈局限性分布，對(duì)腎組織epo(促紅細(xì)胞生成素)基因表達(dá)和合成的過(guò)程中有重要作用，此外，還通過(guò)上調(diào)十二指腸的細(xì)胞色素和二價(jià)金屬轉(zhuǎn)運(yùn)體-1的表達(dá)提高鐵在腸道的吸收，并且有降低肝殺菌肽表達(dá)的作用，在鐵代謝過(guò)程中起主導(dǎo)作用；hif-3α的結(jié)構(gòu)與其他亞型不同，沒(méi)有dna結(jié)合區(qū)域，不能影響基因的表達(dá)。研究表明，hif-3α可能在hif介導(dǎo)的基因表達(dá)中有負(fù)調(diào)節(jié)的作用。因此，hif-1α、hif-2α在低氧反應(yīng)過(guò)程中發(fā)揮一定的作用。一項(xiàng)hif-1α、hif-2α基因缺失的小鼠試驗(yàn)中，證實(shí)hif-1α、hif-2α在低氧反應(yīng)過(guò)程中的必要性。而治療慢性腎性貧血的化合物研發(fā)中，hif-2α的變化較hif-1α更重要。

2、hif-2α亞基和arnt亞基均屬于堿性螺旋-環(huán)-螺旋(bhlh)家族中per-arnt-sim(pas)亞科，兩個(gè)亞基結(jié)構(gòu)類似，主要包含n端的bhlh(dnabonding?domain，dbd，dna結(jié)合區(qū)域)，以及兩個(gè)相鄰的pasa和pasb結(jié)構(gòu)域(ligand?bonding?domain，lbd，配體結(jié)合區(qū)域)；c端與轉(zhuǎn)錄輔助因子結(jié)合，調(diào)節(jié)下游基因的轉(zhuǎn)錄。研究發(fā)現(xiàn)hif-2α亞基的pasb結(jié)構(gòu)域的內(nèi)部存在一個(gè)約的空腔，結(jié)合了調(diào)節(jié)劑后能夠影響hif-2α亞基和arnt亞基形成異源二聚化，進(jìn)而阻斷或激活dna的結(jié)合和靶基因的轉(zhuǎn)錄。hif-2α下游靶基因如血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(vegf)、紅細(xì)胞生成素(epo)、細(xì)胞周期蛋白(cyclin1)和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(glut1)等，這些基因與腎臟疾病、腎性貧血、心血管疾病、感染、癌癥等相關(guān)。

3、腎臟疾病患者的腎臟組織受損會(huì)導(dǎo)致epo缺乏和鐵穩(wěn)態(tài)不足進(jìn)而引起腎性貧血。腎性貧血不僅嚴(yán)重降低患者的生活質(zhì)量，而且是心血管疾病發(fā)生和死亡率增加的重要因素。重組人紅細(xì)胞生成素(rhuepo)或紅細(xì)胞生成刺激劑(esas)可通過(guò)增加血紅蛋白水平來(lái)治療腎性貧血。然而，臨床試驗(yàn)中較高的血紅蛋白目標(biāo)與心血管副作用發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)呈正相關(guān)。目前，一種新興的腎性貧血療法是通過(guò)藥理抑制脯氨酰羥化酶phd穩(wěn)定hif-2蛋白，以刺激腎或非腎組織中內(nèi)源性epo的產(chǎn)生。但phd抑制劑過(guò)度上調(diào)的hif-1α促進(jìn)炎癥通路，加速心臟和腎臟損傷，進(jìn)而引發(fā)肺動(dòng)脈高壓和炎癥風(fēng)險(xiǎn)增加，而hif-2α激活則具有保護(hù)作用。因此，hif-2α選擇性激動(dòng)劑可能更具治療優(yōu)勢(shì)。

4、腎臟病的典型病理變化是腎臟纖維化。kyoung?hk等人發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)期激活的hif-2α有助于抑制腎臟纖維化并改善腎功能。yu等人發(fā)現(xiàn)，在給予phd抑制劑l-mimosine的早期，選擇性激活的hif-1α?xí)?dǎo)致纖維化因子ctgf和磷酸化smad表達(dá)增加，加重腎組織巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)和纖維化；而在中晚期主要激活hif-2α，則上調(diào)epo和vegf表達(dá)，減輕腎損傷。qu等人證實(shí)hif-2α敲除會(huì)導(dǎo)致更嚴(yán)重的腎臟損傷。綜上所述，在腎臟急慢性損傷中，hif-1α的過(guò)度激活可能加劇腎臟損傷，而hif-2α發(fā)揮保護(hù)作用。

5、氯苯唑酸(tafamidis，2-(3,5-二氯苯基)-1,3-苯并噁唑-6-甲酸)和氯苯唑酸葡甲胺(tafamidis?meglumine，2-(3,5-二氯苯基)-1,3-苯并噁唑-6-羧酸1-脫氧-1-(甲氨基)-d-葡萄糖醇鹽，又名：氯苯唑酸葡氨酸鹽)是轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白穩(wěn)定劑，最早由美國(guó)輝瑞公司生產(chǎn)研發(fā)。vyndamax和vyndaqel都是用于口服施用的膠囊，并且包含氯苯唑酸作為活性部分。美國(guó)食品和藥物管理局(u.s.food?and?drugadministration，fda)已經(jīng)批準(zhǔn)vyndaqel和vyndamax用于治療成人的野生型或遺傳性甲狀腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白介導(dǎo)的淀粉樣變性心肌病，以降低心血管死亡率和心血管相關(guān)的住院治療。ema已經(jīng)批準(zhǔn)vyndaqel用于治療患有ⅰ期癥狀性多發(fā)性神經(jīng)病的成人患者的甲狀腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白淀粉樣變性，以延遲周圍神經(jīng)損害。

6、氯苯唑酸在臨床上使用多年，其安全性得到驗(yàn)證，因此對(duì)其開(kāi)發(fā)出其他適應(yīng)癥，能夠進(jìn)一步造福人類。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明旨在提供一種氯苯唑酸及其類似物及其鹽在預(yù)防、減輕或治療與hif-2a相關(guān)疾病中的用途，實(shí)現(xiàn)“老藥新用”，節(jié)約了藥物研發(fā)成本和治療成本，具有明顯的經(jīng)濟(jì)效益和臨床應(yīng)用價(jià)值。

2、一方面，本發(fā)明提供了氯苯唑酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，或包含氯苯唑酸或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物在制備用于預(yù)防、減輕或治療與hif-2α活性相關(guān)疾病的藥物中的用途。

3、在一些實(shí)施例中，所述氯苯唑酸的藥學(xué)上可接受的鹽為酸加成鹽或堿加成鹽。

4、在一些實(shí)施例中，所述氯苯唑酸的藥學(xué)上可接受的鹽選自以下結(jié)構(gòu)中至少一種：

5、

6、

7、

8、在一些實(shí)施例中，所述氯苯唑酸的藥學(xué)上可接受的鹽為氯苯唑酸葡甲胺。

9、在一些實(shí)施例中，所述藥物組合物進(jìn)一步包含藥學(xué)上可接受的輔料。

10、在一些實(shí)施例中，所述與hif-2α活性相關(guān)疾病包括造血障礙、貧血、在外科手術(shù)后與手術(shù)相關(guān)的局部缺血狀態(tài)及其連續(xù)癥狀、外科手術(shù)的傷口愈合、慢性腎臟病、心血管疾病、感染、炎癥性疾病、癌癥以及在癌癥治療過(guò)程中發(fā)生的健康狀態(tài)的損傷，或急性和延長(zhǎng)性腦局部缺血狀態(tài)的連續(xù)癥狀。

11、在一些實(shí)施例中，所述與hif-2α活性相關(guān)疾病包括腎性貧血、原發(fā)性貧血、伴有腫瘤疾病的貧血、化療誘導(dǎo)的貧血、由于失血導(dǎo)致的貧血、缺鐵性貧血、維生素缺乏性貧血、發(fā)育不全和再生障礙性貧血、溶血性貧血、由于鐵利用障礙(鐵失利用性貧血)或者由于其它內(nèi)分泌紊亂(例如甲狀腺功能減退)導(dǎo)致的貧血、使用心肺機(jī)的心臟介入術(shù)(例如分流手術(shù)，心臟瓣膜移植)、頸動(dòng)脈介入術(shù)、主動(dòng)脈介入術(shù)和使用儀器開(kāi)口或者穿透顱蓋的介入術(shù)導(dǎo)致的局部缺血狀態(tài)及其連續(xù)癥狀、原發(fā)性腎小球腎炎、高血壓腎小動(dòng)脈硬化、糖尿病腎病、繼發(fā)性腎小球腎炎、腎小管間質(zhì)病變(慢性腎盂腎炎、慢性尿酸性腎病、梗阻性腎病、藥物性腎病等)、缺血性腎病、遺傳性腎病(多囊腎、遺傳性腎炎)、心功能不全、冠心病、心絞痛、心肌梗塞、中風(fēng)、動(dòng)脈硬化、原發(fā)性、肺和惡性高血壓和周圍動(dòng)脈閉塞性疾病、hiv感染、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，或者使用細(xì)胞抑制劑、抗生素和放射治療后，風(fēng)濕性形式范圍的疾病或其它被視為自身免疫疾病的疾病形式的疾病，在這類疾病的藥物治療過(guò)程中發(fā)生的健康狀態(tài)的損傷(例如中風(fēng)、分娩窒息)。

12、在一些實(shí)施例中，所述與hif-2α活性相關(guān)疾病包括貧血、缺血、血管疾病、心絞痛、心肌梗塞、代謝障礙或癌癥。

13、在一些實(shí)施例中，所述與hif-2α活性相關(guān)疾病包括腎性貧血和/或腎病。

14、在一些實(shí)施例中，所述氯苯唑酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，或包含氯苯唑酸或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物，通過(guò)對(duì)hif-2α調(diào)控的下游vegf基因具有上調(diào)作用實(shí)現(xiàn)預(yù)防、減輕或治療與hif-2α活性相關(guān)疾病。

15、在一些實(shí)施例中，所述氯苯唑酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，或包含氯苯唑酸或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物，通過(guò)對(duì)hif-2α調(diào)控的下游epo基因具有上調(diào)作用實(shí)現(xiàn)預(yù)防、減輕或治療與hif-2α活性相關(guān)疾病。

16、另一方面，本發(fā)明提供一種聯(lián)合用藥，所述氯苯唑酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，或包含氯苯唑酸或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物，進(jìn)一步與脯氨酰羥化酶抑制劑聯(lián)合，在制備預(yù)防、減輕或治療與hif-2α活性相關(guān)疾病的藥物中的用途。

17、有益效果：

18、相比現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的某一個(gè)實(shí)施例具有以下至少一個(gè)有益效果：

19、(1)本發(fā)明通過(guò)rt-qpcr確定氯苯唑酸對(duì)hif-2α調(diào)控的下游vegf和epo基因具有上調(diào)作用。表明氯苯唑酸能夠有效激活hif-2α下游靶基因的表達(dá)，這種激活作用可能對(duì)治療缺血性疾病或貧血等疾病有潛在的治療價(jià)值。

20、(2)在馬兜鈴酸誘導(dǎo)的斑馬魚慢性腎臟病模型上，證實(shí)氯苯唑酸具有增加紅細(xì)胞生成和緩解腎損傷作用。表明氯苯唑酸對(duì)腎臟具有保護(hù)作用，也對(duì)改善腎性貧血具有顯著的效果。

21、(3)在5/6腎臟切除手術(shù)大鼠模型上，氯苯唑酸增加慢性腎臟病大鼠的紅細(xì)胞數(shù)量，顯示出治療腎性貧血的潛在價(jià)值。同時(shí)通過(guò)與羅沙司他對(duì)比，說(shuō)明氯苯唑酸在促紅細(xì)胞生成效果和腎臟安全性之間實(shí)現(xiàn)了良好的平衡。

22、(4)在順鉑誘導(dǎo)的腎臟損傷和腎性貧血模型上，氯苯唑酸顯著增加腎性貧血大鼠的紅細(xì)胞數(shù)量，血紅蛋白水平和紅細(xì)胞比容，表現(xiàn)出治療腎性貧血潛力。尿液分析和組學(xué)性質(zhì)分析發(fā)現(xiàn)，氯苯唑酸具有修復(fù)腎臟損傷，重點(diǎn)是緩解腎臟纖維化的作用。

23、(5)在單側(cè)輸尿管梗阻引起的腎臟損傷模型上，氯苯唑酸表現(xiàn)出強(qiáng)效的治療腎臟損傷和緩解缺血效果。

24、(6)通過(guò)熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)，發(fā)現(xiàn)氯苯唑酸和氯苯唑酸葡甲胺均具有顯著增強(qiáng)hif-2α的轉(zhuǎn)錄活性的作用。因此，氯苯唑酸及其鹽可用于預(yù)防和/或治療與hif-2α活性相關(guān)疾病。

25、(7)本發(fā)明通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)了氯苯唑酸增強(qiáng)hif-2α的轉(zhuǎn)錄活性，進(jìn)而促進(jìn)hif-2α調(diào)控的下游基因的表達(dá)；并在馬兜鈴酸誘導(dǎo)的斑馬魚慢性腎臟病模型、順鉑導(dǎo)致的急性腎臟損傷和腎性貧血模型和單側(cè)輸尿管梗阻模型上，證實(shí)氯苯唑酸具有增加紅細(xì)胞生成和緩解腎損傷作用。本發(fā)明通過(guò)一系列實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證氯苯唑酸及其鹽能用于預(yù)防和/或治療與hif-2α活性相關(guān)疾病，尤其是腎性貧血或腎病。

26、術(shù)語(yǔ)說(shuō)明

27、現(xiàn)在詳細(xì)描述本發(fā)明的某些實(shí)施方案，其實(shí)例由隨附化學(xué)式說(shuō)明。本發(fā)明意圖涵蓋所有的替代、修改和等同技術(shù)方案，它們均包括在如權(quán)利要求定義的本發(fā)明范圍內(nèi)。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)認(rèn)識(shí)到，許多與本文所述類似或等同的方法和材料能夠用于實(shí)踐本發(fā)明。本發(fā)明絕不限于本文所述的方法和材料。在所結(jié)合的文獻(xiàn)、專利和類似材料的一篇或多篇與本技術(shù)不同或相矛盾的情況下(包括但不限于所定義的術(shù)語(yǔ)、術(shù)語(yǔ)應(yīng)用、所描述的技術(shù)，等等)，以本技術(shù)為準(zhǔn)。

28、應(yīng)進(jìn)一步認(rèn)識(shí)到，本發(fā)明的某些特征，為清楚可見(jiàn)，在多個(gè)獨(dú)立的實(shí)施方案中進(jìn)行了描述，但也可以在單個(gè)實(shí)施例中以組合形式提供。反之，本發(fā)明的各種特征，為簡(jiǎn)潔起見(jiàn)，在單個(gè)實(shí)施方案中進(jìn)行了描述，但也可以單獨(dú)或以任意適合的子組合提供。

29、除非另外說(shuō)明，本發(fā)明所使用的所有科技術(shù)語(yǔ)具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域技術(shù)人員的通常理解相同的含義。本發(fā)明涉及的所有專利和公開(kāi)出版物通過(guò)引用方式整體并入本發(fā)明。

30、在本說(shuō)明書的描述中，參考術(shù)語(yǔ)“一個(gè)實(shí)施例”、“一些實(shí)施例”、“示例”、“具體示例”、或“一些示例”等的描述意指結(jié)合該實(shí)施例或示例描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點(diǎn)包含于本發(fā)明的至少一個(gè)實(shí)施例或示例中。在本說(shuō)明書中，對(duì)上述術(shù)語(yǔ)的示意性表述不必須針對(duì)的是相同的實(shí)施例或示例。而且，描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點(diǎn)可以在任一個(gè)或多個(gè)實(shí)施例或示例中以合適的方式結(jié)合。此外，在不相互矛盾的情況下，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以將本說(shuō)明書中描述的不同實(shí)施例或示例以及不同實(shí)施例或示例的特征進(jìn)行結(jié)合和組合。

31、在下面的內(nèi)容中，無(wú)論是否使用“大約”或“約”等字眼，所有在此公開(kāi)了的數(shù)字均為近似值。每一個(gè)數(shù)字的數(shù)值有可能會(huì)出現(xiàn)1％、2％、5％、7％、8％、10％、15％或20％等差異。每當(dāng)公開(kāi)一個(gè)具有n值的數(shù)字時(shí)，任何具有n+/-1％,n+/-2％,n+/-3％,n+/-5％,n+/-7％,n+/-8％,n+/-10％,n+/-15％或n+/-20％值的數(shù)字會(huì)被明確地公開(kāi),其中“+/-”是指加或減。