本發(fā)明屬于發(fā)酵工程的，具體涉及增強(qiáng)肉羊瘤胃功能的功效物質(zhì)組配伍及應(yīng)用的。
背景技術(shù)：
1、酵母培養(yǎng)物是一種安全、健康的飼料添加劑，在動(dòng)物生產(chǎn)和營(yíng)養(yǎng)健康方面得到了廣泛的關(guān)注和應(yīng)用。然而，由于酵母培養(yǎng)物是一種非標(biāo)產(chǎn)品，我國(guó)目前尚未出臺(tái)相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，因此市場(chǎng)現(xiàn)有產(chǎn)品質(zhì)量良莠不齊，使用效果也存在差異。這些差異來(lái)自于不同的生產(chǎn)工藝、原料、菌種等因素。
2、采用非靶標(biāo)代謝組學(xué)檢測(cè)酵母培養(yǎng)物化學(xué)物質(zhì)成分，發(fā)現(xiàn)其富含數(shù)千種化學(xué)物質(zhì)成分，不同產(chǎn)品間存在數(shù)百種差異代謝物，在動(dòng)物的應(yīng)用效果上也存在不同作用。因此，在非標(biāo)、成分極其復(fù)雜且存在差異的酵母培養(yǎng)物產(chǎn)品中找出關(guān)鍵功效物質(zhì)，無(wú)疑是解析產(chǎn)品核心內(nèi)容的關(guān)鍵任務(wù)，也是進(jìn)一步闡明產(chǎn)品功效機(jī)理的核心工作。
3、湖羊原產(chǎn)于浙江太湖流域，以高繁殖率（多胎性）和舍飼適應(yīng)性著稱。近年來(lái)新疆為優(yōu)化羊群結(jié)構(gòu)、提高養(yǎng)殖效益，逐步引入湖羊。
4、哈薩克羊是新疆地區(qū)的古老原始羊系之一，也是我國(guó)粗毛綿羊三大品種之一，以較高的肉脂生產(chǎn)能力而聞名，是新疆存欄數(shù)量占比最大、存量最多的肉脂兼用型粗毛羊品種。
5、新疆的湖羊養(yǎng)殖以農(nóng)區(qū)和規(guī)模場(chǎng)為主，側(cè)重經(jīng)濟(jì)效益；哈薩克羊則是牧區(qū)生計(jì)與生態(tài)的支柱。兩者互補(bǔ)發(fā)展，共同支撐新疆肉羊產(chǎn)業(yè)的多元化需求。
6、目前，針對(duì)酵母培養(yǎng)物的功效物質(zhì)的研究中，主要集中于小尾寒羊的研究，關(guān)于新疆地方主流肉羊品種通用的替代酵母培養(yǎng)物的功效物質(zhì)研究較少。由于不同品種的肉羊在營(yíng)養(yǎng)需求上存在差異，不同品種的瘤胃體積和消化能力也會(huì)影響其對(duì)飼料的利用效率，因此如何探尋增強(qiáng)肉羊瘤胃功能的功效物質(zhì)對(duì)于進(jìn)一步激活湖羊、哈薩克羊等肉羊品種生產(chǎn)潛力具有重要意義。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中目前尚未有關(guān)于增強(qiáng)肉羊瘤胃功能的功效物質(zhì)的技術(shù)問(wèn)題，提供適用于增強(qiáng)肉羊瘤胃功能物質(zhì)組配伍與應(yīng)用的方法，本技術(shù)通過(guò)不同酵母培養(yǎng)物產(chǎn)品對(duì)瘤胃體外發(fā)酵參數(shù)及瘤胃優(yōu)勢(shì)菌屬存在顯著正向調(diào)節(jié)作用及具有顯著對(duì)應(yīng)關(guān)系的代謝物其比例關(guān)系，最終確定了硫胺素、l-蘇氨酸、n-甲基-d-天冬氨酸、氨基葡萄糖、左旋肉堿、γ-生育三烯酚、肌醇、花青素和甜菜堿為關(guān)鍵功效物質(zhì)，不同添加劑量的配伍物質(zhì)均可極顯著提高瘤胃的產(chǎn)氣量、微生物蛋白含量、總揮發(fā)性脂肪酸含量、尤其對(duì)提升丙酸、異丁酸的含量極顯著，進(jìn)而極顯著（ p<0.01）降低了乙丙比。有效改善肉羊瘤胃發(fā)酵的特性，促進(jìn)肉羊瘤胃發(fā)酵由乙酸型向丙酸型改變，從而提升機(jī)體的飼料轉(zhuǎn)化效率。
2、為實(shí)現(xiàn)這一技術(shù)目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
3、一方面，本技術(shù)提供一種增強(qiáng)肉羊瘤胃功能的功效物質(zhì)組，由硫胺素、l-蘇氨酸、n-甲基-d-天冬氨酸、氨基葡萄糖、左旋肉堿、γ-生育三烯酚、肌醇、花青素和甜菜堿組成的。
4、優(yōu)選的，按重量計(jì)算，將9種功效物質(zhì)按化學(xué)純品進(jìn)行配比，其數(shù)量關(guān)系為硫胺素：l-蘇氨酸：n-甲基-d-天冬氨酸：氨基葡萄糖：左旋肉堿：γ-生育三烯酚：肌醇：花青素：甜菜堿=10.58：2.09：8.42：1.53：5.64：3.76：7.65：2.92：57.41。
5、所述的功效物質(zhì)組添加量為每0.4g高精日糧種添加0.007mg-0.026mg功效物質(zhì)組的純品。
6、更進(jìn)一步的本技術(shù)提供所述的適用于功效物質(zhì)組的篩選方法，其特征在于，采用如下步驟：
7、（1）自研酵母培養(yǎng)物發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行非靶向代謝組學(xué)分析，并檢測(cè)出439種成分；篩選與兩種酵母培養(yǎng)物中的代謝成分一致的319種成分，且選取在酵母培養(yǎng)物中的含量顯著高于發(fā)酵培養(yǎng)基2倍以上的49種差異代謝成分與mfaei進(jìn)行相關(guān)性分析；
8、（2）基于步驟（1）種在去除培養(yǎng)基成分后，篩選xp與yc酵母培養(yǎng)物中281種代謝成分，其中160種為兩種酵母培養(yǎng)物間的差異代謝成分，121種為相同代謝成分；通過(guò)篩選獲得的281種代謝成分與mfaei進(jìn)行相關(guān)性分析，分別篩選出與mfaei呈顯著正相關(guān)的62種差異代謝成分和58種相同代謝成分；
9、（3）基于步驟（1）及步驟（2）中的篩選結(jié)果，初步確定酵母培養(yǎng)物中促進(jìn)瘤胃發(fā)酵的功能性代謝物質(zhì)為與mfaei呈顯著正相關(guān)，且與各瘤胃體外發(fā)酵參數(shù)及優(yōu)勢(shì)菌屬均呈現(xiàn)顯著對(duì)應(yīng)關(guān)系的9種代謝物；
10、（4）以mfaei作為因變量y，9種功能性物質(zhì)的相對(duì)含量設(shè)為自變量x1至x9，分別建立一元回歸模型y=f(xi)；采用以下六種回歸模型：
11、線性回歸模型：y=b0+b1x；
12、二次多項(xiàng)式回歸模型：y=b0+b1x+b2x^2；
13、復(fù)合函數(shù)模型：y=b0b1x^2；
14、增長(zhǎng)函數(shù)模型：y=e^(b0+b1x)；
15、指數(shù)函數(shù)模型：y=ax；
16、logistic回歸模型：y(t)=1/(1+x-1)；
17、在mfaei（y）與代謝物x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7、x8和x9的一元回歸模型中，二次多項(xiàng)式模型的擬合效果最佳，r2系數(shù)最接近1（r2>0.5， p<0.05）：
18、y=-0.246?x12+0.847?x1+3.443，極值x1=1.52；
19、y=0.425?x22-1.236?x2+4.490，極值x2=0.30；
20、y=-0.485?x32+1.496?x3+3.058，極值x3=1.21；
21、y=0.305?x42-0.966?x4+4.369，極值x4=0.22；
22、y=0.142?x52-0.802?x5+4.728，極值x5=0.81；
23、y=0.312?x62-1.174?x6+4.697，極值x6=0.54；
24、y=6.389?x72-17.927?x7+16.156，極值x7=1.10；
25、y=0.483?x82-1.434x8+4.672，極值x8=0.42；
26、y=0.002?x92+0.087x9+3.385，極值x9=8.25；
27、（5）根據(jù)步驟（4）中方程計(jì)算得出，當(dāng)mfaei最大值時(shí)，酵母培養(yǎng)物中9種功能性物質(zhì)的最適含量分別為：x1=1.52%，x2=0.30%，x3=1.21%，x4=0.22%，x5=0.81%，x6=0.81%，x7=1.10%，x8=0.42%，x9=8.25%。
28、更進(jìn)一步的，本技術(shù)還提供所述的適用于增強(qiáng)肉羊瘤胃功能的功效物質(zhì)組在改善肉羊瘤胃發(fā)酵的特性中的應(yīng)用。
29、更進(jìn)一步的，本技術(shù)還提供所述的適用于增強(qiáng)肉羊瘤胃功能的功效物質(zhì)組在制備獲得的微生態(tài)制劑中的應(yīng)用。
30、更進(jìn)一步的，本技術(shù)還提供所述的適用于增強(qiáng)肉羊瘤胃功能的功效物質(zhì)組在制備獲得的綿羊飼料添加劑中的應(yīng)用。
31、更進(jìn)一步的，本技術(shù)還提供所述的適用于增強(qiáng)肉羊瘤胃功能的功效物質(zhì)組在制備獲得的綿羊飼料中的應(yīng)用。
32、更進(jìn)一步的，本技術(shù)還提供所述的適用于增強(qiáng)肉羊瘤胃功能的功效物質(zhì)組在反芻動(dòng)物中的相關(guān)應(yīng)用。
33、優(yōu)選的，所述的肉羊優(yōu)選為湖羊和哈薩克羊。
34、關(guān)于新發(fā)明新創(chuàng)造采用現(xiàn)有公知常識(shí)作為現(xiàn)有技術(shù)基礎(chǔ)的問(wèn)題。事實(shí)上，除了開(kāi)創(chuàng)性的發(fā)明外，任何一項(xiàng)發(fā)明創(chuàng)造都是離不開(kāi)現(xiàn)有技術(shù)手段和技術(shù)要素為基礎(chǔ)，都是在現(xiàn)有技術(shù)手段基礎(chǔ)上經(jīng)過(guò)進(jìn)一步創(chuàng)新的結(jié)果。對(duì)于瘤胃體外發(fā)酵技術(shù)、建立回歸方程模型等技術(shù)都是現(xiàn)有技術(shù)基礎(chǔ)，但是如何使得酵母培養(yǎng)物中的有效成分被合理的篩選獲得，如何協(xié)調(diào)有效成分之間的配比，如何使得適用于新疆地方主流肉羊品種通用替代酵母培養(yǎng)物的功效物質(zhì)在經(jīng)過(guò)一系列的篩選配比獲得有效改善肉羊瘤胃發(fā)酵的特性，促進(jìn)肉羊瘤胃發(fā)酵由乙酸型向丙酸型改變，從而提升機(jī)體的飼料轉(zhuǎn)化效率的特點(diǎn)都需要通過(guò)一系列不可預(yù)見(jiàn)的科學(xué)試驗(yàn)反復(fù)驗(yàn)證得出。正是由于這些原因，本技術(shù)雖然利用了常規(guī)技術(shù)手段為基礎(chǔ)，并在此基礎(chǔ)上經(jīng)過(guò)科學(xué)實(shí)驗(yàn)提供了一種適用于增強(qiáng)肉羊瘤胃功能的功效物質(zhì)組及其應(yīng)用方法，提供的適用于增強(qiáng)肉羊瘤胃功能的功效物質(zhì)組制備方法中的各個(gè)技術(shù)步驟形成整體，具有整體不可分割性、不能隨意肢解其中的技術(shù)步驟，這些制備方法整體才能夠達(dá)到有效改善肉羊瘤胃發(fā)酵的特性，促進(jìn)肉羊瘤胃發(fā)酵由乙酸型向丙酸型改變，從而提升機(jī)體的飼料轉(zhuǎn)化效率的效果，具有廣泛的實(shí)用價(jià)值。
35、通過(guò)實(shí)施本發(fā)明的技術(shù)方案，可以達(dá)到以下有益效果：
36、（1）本技術(shù)提供了適用于增強(qiáng)肉羊瘤胃功能的功效物質(zhì)組，根據(jù)不同酵母培養(yǎng)物產(chǎn)品對(duì)瘤胃體外發(fā)酵參數(shù)及瘤胃優(yōu)勢(shì)菌屬存在顯著正向調(diào)節(jié)作用及具有顯著對(duì)應(yīng)關(guān)系的代謝物其比例關(guān)系，最終確定了硫胺素、l-蘇氨酸、n-甲基-d-天冬氨酸、氨基葡萄糖、左旋肉堿、γ-生育三烯酚、肌醇、花青素和甜菜堿為關(guān)鍵功效物質(zhì)，其在酵母培養(yǎng)物中的含量分別為x1=1.52%，x2=0.30%，x3=1.21%，x4=0.22%，x5=0.81%，x6=0.81%，x7=1.10%，x8=0.42%，x9=8.25%。換算其比例關(guān)系為硫胺素：l-蘇氨酸：n-甲基-d-天冬氨酸：氨基葡萄糖：左旋肉堿：γ-生育三烯酚：肌醇：花青素：甜菜堿==10.58：2.09：8.42：1.53：5.64：3.76：7.65：2.92：57.41。最終確定了9種物質(zhì)為酵母培養(yǎng)物的關(guān)鍵功效物質(zhì)，同時(shí)確定了其含量比例。
37、（2）本技術(shù)提供的適用于增強(qiáng)肉羊瘤胃功能的功效物質(zhì)組在瘤胃體外發(fā)酵條件下，不同添加劑量的配伍物質(zhì)均可極顯著（ p<0.01）提高瘤胃的產(chǎn)氣量、微生物蛋白含量、總揮發(fā)性脂肪酸含量、尤其對(duì)提升丙酸、異丁酸的含量極顯著（ p<0.01），進(jìn)而極顯著（ p<0.01）降低了乙丙比。有效改善肉羊瘤胃發(fā)酵的特性，促進(jìn)肉羊瘤胃發(fā)酵由乙酸型向丙酸型改變，從而提升機(jī)體的飼料轉(zhuǎn)化效率。最小劑量組即可發(fā)揮極顯著作用。