本發(fā)明涉及藏紅花素提取，具體為一種基于酶解與微波超聲的藏紅花素提取方法。
背景技術(shù)：
1、藏紅花，中藥材名，是鳶尾科植物，其又名西紅花、番紅花，含有西紅花苷和西紅花酸等化學(xué)成分，藏紅花的核心價值在于藏紅花花柱中的西紅花苷，藏紅花原生長地位于中海沿岸至喜馬拉雅山麓，由于其產(chǎn)量極低，采收耗時費(fèi)力，被列為珍稀名貴中藥材，致使其價格昂貴，被譽(yù)為“植物黃金”,藏紅花中含有豐富的活性成分，如藏紅花苷、藏紅花素和藏紅花酸等，這也使之在化妝品及醫(yī)藥領(lǐng)域具有巨大的潛力。
2、藏紅花素提取多采用乙醇浸提或水提法，專利中公開了申請?zhí)枴?02110619330.9”的“一種西紅花提取物及其制備方法和其應(yīng)用”，該專利中提到西紅花提取工藝中，存在溶劑殘留高(≥500ppm)或提取率很低且活性物質(zhì)提取率低且提取時間較長，不利于工業(yè)化生產(chǎn)，專利中公開了申請?zhí)枴?02111634342.5”的“一種藏紅花發(fā)酵物及其制備方法和應(yīng)用”該專利中利用釀酒酵母菌和紅曲霉菌發(fā)酵藏紅花柱頭，但發(fā)酵條件調(diào)控難度高、產(chǎn)物組成不確定性大等風(fēng)險，與此同時，藏紅花柱頭產(chǎn)量極低，難以滿足實(shí)際市場需求，也進(jìn)一步增加了技術(shù)開發(fā)和商業(yè)化推廣的難度，為此，我們提出一種基于酶解與微波超聲的藏紅花素提取方法，采用酶解、微波、大孔樹脂進(jìn)行富集、分離和純化，以提高藏紅花中藏紅花素含量。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的在于提供一種基于酶解與微波超聲的藏紅花素提取方法，以解決上述背景技術(shù)中提出的問題。
2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：一種基于酶解與微波超聲的藏紅花素提取方法，包括以下步驟：
3、s1：取新鮮藏紅花花瓣，剔除其中的雜質(zhì)，在25℃下陰干6h以去除表層水分，然后放入35℃恒溫濕條件下烘干12h，將干燥后的藏紅花花瓣放入超微粉碎機(jī)中粉碎；
4、s2：按料液比1：20加入檸檬酸緩沖液至粉碎后的藏紅花粉末中，將混合液投入酶解反應(yīng)罐攪拌30min，并向反應(yīng)罐中充入氮?dú)?，濃度控制?.5％～5％之間，加入纖維素酶，在35℃下預(yù)反應(yīng)30min，并進(jìn)行攪拌，加入木聚糖酶，在40℃下振蕩酶解2h，并進(jìn)行攪拌；
5、s3：將酶解后的液體轉(zhuǎn)移至微波反應(yīng)釜中：
6、a1：第一階段，功率控制300w，溫度升至50℃，持續(xù)5min；
7、a2：第二階段，功率控制500w，脈沖模式，溫度55℃，維持15min；
8、a3：第三階段，關(guān)閉微波，啟動內(nèi)置冷卻盤管，10min內(nèi)降溫至40℃以下；
9、s4：將微波處理后的混合液迅速轉(zhuǎn)移至冰水浴中，冷卻至10℃以下，攪拌5min，使用800～1000目的篩網(wǎng)進(jìn)行過濾，然后在4℃下進(jìn)行離心過濾，取上清液，將上清液上d101大孔樹脂，用純凈水洗脫雜質(zhì)至無色無味，洗脫10個柱體積，再用濃度50％乙醇水溶液洗脫4～8個柱體積，收集洗脫液；
10、s5：將洗脫液進(jìn)行減壓低溫真空濃縮，并回收乙醇，將濃縮浸膏冷凍干燥成粉末，得到高純度的藏紅花素。
11、優(yōu)選的，所述藏紅花花瓣放入超微粉碎機(jī)中粉碎，直至粒徑≤10μm。
12、優(yōu)選的，所述檸檬酸緩沖液濃度為0.1m，ph為5.0，氮?dú)獾臐舛瓤刂圃?.5％～5％之間。
13、優(yōu)選的，所述纖維素酶的濃度為0.5％～1.0％w/w，木聚糖酶的濃度為0.3％～0.6％w/w。
14、優(yōu)選的，所述預(yù)反應(yīng)的攪拌速率為150rpm/min，振動酶解的攪拌速率為100rpm/min且攪拌30min。
15、優(yōu)選的，所述第二階段的脈沖的頻率為開10s/關(guān)5s。
16、優(yōu)選的，所述上清液上d101大孔樹脂的流速為1.0bv/h，洗脫10個柱體積的流速為2.0bv/h，乙醇水溶液洗脫的流速為1.0bv/h。
17、優(yōu)選的，所述洗脫液減壓低溫真空濃縮，溫度t≤40℃，壓強(qiáng)≥0.1kpa。
18、優(yōu)選的，所述上清液上d101大孔樹脂，采用濕法上柱，飽和吸附45min。
19、優(yōu)選的，所述酶解液轉(zhuǎn)移至微波反應(yīng)釜，控制液層厚度≤10cm。
20、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：
21、本發(fā)明通過該方法，借助酶解與微波協(xié)同提升藏紅花素提取效果，加入纖維素酶和木聚糖酶，在溫和條件下破壞細(xì)胞壁骨架，促進(jìn)藏紅花素釋放，即使減少酶用量，提取率仍高于傳統(tǒng)法，微波加熱快速均勻升溫，脈沖模式避免局部過熱，加速藏紅花素擴(kuò)散并減少降解，二者協(xié)同作用，不僅高效釋放目標(biāo)成分，還減少雜質(zhì)提取，使產(chǎn)品純度提高，同時大幅縮短加熱時間，提升整體提取效率與產(chǎn)品質(zhì)量。
1.一種基于酶解與微波超聲的藏紅花素提取方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于酶解與微波超聲的藏紅花素提取方法，其特征在于：所述藏紅花花瓣放入超微粉碎機(jī)中粉碎，直至粒徑≤10μm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于酶解與微波超聲的藏紅花素提取方法，其特征在于：所述檸檬酸緩沖液濃度為0.1m，ph為5.0，氮?dú)獾臐舛瓤刂圃?.5％～5％之間。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于酶解與微波超聲的藏紅花素提取方法，其特征在于：所述纖維素酶的濃度為0.5％～1.0％w/w，木聚糖酶的濃度為0.3％～0.6％w/w。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于酶解與微波超聲的藏紅花素提取方法，其特征在于：所述預(yù)反應(yīng)的攪拌速率為150rpm/min，振動酶解的攪拌速率為100rpm/min且攪拌30min。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于酶解與微波超聲的藏紅花素提取方法，其特征在于：所述第二階段的脈沖頻率為開10s/關(guān)5s。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于酶解與微波超聲的藏紅花素提取方法，其特征在于：所述上清液上d101大孔樹脂的流速為1.0bv/h，洗脫10個柱體積的流速為2.0bv/h，乙醇水溶液洗脫的流速為1.0bv/h。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于酶解與微波超聲的藏紅花素提取方法，其特征在于：所述洗脫液減壓低溫真空濃縮，溫度t≤40℃，壓強(qiáng)≥0.1kpa。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于酶解與微波超聲的藏紅花素提取方法，其特征在于：所述上清液上d101大孔樹脂，采用濕法上柱，飽和吸附45min。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于酶解與微波超聲的藏紅花素提取方法，其特征在于：所述酶解液轉(zhuǎn)移至微波反應(yīng)釜，控制液層厚度≤10cm。